根據(jù)流動(dòng)相和固定相相對(duì)極性不同,液相色譜分為正相色譜和
反相色譜柱。流動(dòng)相極性大于固定相極性的情況,稱(chēng)為反相色譜柱。非極性鍵合相色譜可作反相色譜柱。在現(xiàn)代液相色譜中應(yīng)用醉廣泛,現(xiàn)代液相色譜分析工作的70%以上是在非極性鍵合固定相上進(jìn)行的。
反相色譜柱是指利用非極性的反相介質(zhì)為固定相,極性有機(jī)溶劑的水溶液為流動(dòng)相,根據(jù)溶質(zhì)極性(疏水性)的差別進(jìn)行溶質(zhì)分離與純化的洗脫色譜法。與HIC一樣,RPC中溶質(zhì)也通過(guò)疏水性相互作用分配于固定相表面,但是,RPC固定相表面*被非極性基團(tuán)所覆蓋,表現(xiàn)出強(qiáng)烈的疏水性。因此,必須用極性有機(jī)溶劑(如甲醇、乙腈等)或其水溶液進(jìn)行溶質(zhì)的洗脫分離。
反相色譜柱的安裝步驟:
1、首先應(yīng)確認(rèn)柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積,進(jìn)樣閥、柱子、檢測(cè)器之間的連接管路內(nèi)徑盡可能使用內(nèi)徑較小的管線,同時(shí)控制進(jìn)樣器、色譜柱和檢測(cè)器之間連接管線的長(zhǎng)度。安裝色譜柱之前,確認(rèn)流路系統(tǒng)中的溶劑是否正常。對(duì)分析較復(fù)雜的樣品建議安裝保護(hù)柱。
2、為了使色譜柱與儀器系統(tǒng)達(dá)醉佳的連接效果,應(yīng)盡量使用與色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭,如原來(lái)的接頭長(zhǎng)期匹配其他類(lèi)型的色譜柱,建議在連接新色譜柱前應(yīng)檢查匹配情況,避免造成色譜柱的損壞或因色譜柱不匹配造成的漏液。
3、使用PEEK 材料的通用接頭,只需用手?jǐn)Q緊不需要特定扳手,使用壓力為5000psi;使用溫度不得超過(guò)100℃。